Реакция с аммиачным раствором соли меди
Растворяют 0,003 г вещества в 4 мл воды в термостойкой пробирке, осторожно прибавляют раствор, состоящий из 5 мл раствора нитрата меди и 0,5 мл раствора аммиака, перемешивают. При нагревании на кипящей водяной бане в течение 2 мин появляется темно-желтое окрашивание.
8. Реакция с реактивом Марки. Реакция наиболее характерна для феноксиметилпенициллина (красное окрашивание при комнатной температуре и усиление окраски при нагревании). Остальные пенициллины образуют неокрашенные, а при нагревании желтые или желто-бурые продукты.
Методика выполнения: По 0,005 г вещества помещают в две пробирки и прибавляют по 1 капле воды. В первую пробирку добавляют 2 мл серной кислоты, а во вторую добавляют 2 мл свежеприготовленного реактива Марки, содержимое пробирок перемешивают и отмечают окраску. Затем содержимое пробирок нагревают на водяной бане в течение 1 мин и отмечают окраску.
9. Реакция с хромотроповой кислотой.Реакция наиболее характерна для феноксиметилпенициллина. Остальные пенициллины образуют продукты реакции желто-зеленого или желтого цвета.
Методика выполнения: К 0,002 г вещества прибавляют 0,002 г динатриевой соли хромотроповой кислоты, 2 мл концентрированной серной кислоты и нагревают на масляной или глицериновой бане при температуре 1500С и отмечают секундомером время погружения. Пробирку встряхивают каждые 30 с и отмечают окраску. Реакцию поводят в течение 5 минут.
Полученные результаты представить в виде таблицы.
| Препарат | Время, мин | ||||||||||
| 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,0 | 2,5 | 3,0 | 3,5 | 4,0 | 4,5 | 5,0 | ||
10. Реакция на остаток аминокислоты в ампициллине.За счет остатка фениламиноуксусной кислоты ампициллин реагирует с нингидрином и вступает в реакцию комплексообразования с меди (II) сульфатом.
А) 0,02 г ампициллина растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 мин. Появляется вишневое окрашивание.
Б) 0,01 г вещества растворяют в 1 мл воды и прибавляют 2-3 капли реактива Фелинга. Появляется фиолетовое окрашивание.
Задание II. Выполнить качественные реакции на лекарственные вещества цефалоспоринов (цефалексин, цефалотина натриевая соль).
1. Гидроксамовая реакция. Данная реакция выполняется по методике для препаратов группы пенициллинов.
2. Реакция окисления.Обусловлена наличием атома серы в дигидротиазиновом кольце.
К 0,02 г вещества в пробирке прибавляют несколько капель 80% раствора кислоты серной, содержащей 1% кислоты азотной. Цефалотин дает желтое окрашивание, цефалексин - оливково-зеленое.
Реакция комплексообразования цефалексина.
К 0,02 г вещества в пробирке прибавляют5 капель 1% раствора кислоты уксусной, 2 капли 1% раствора меди (II) сульфата и 1 каплю 2н. раствора натрия гидроксида. Появляется оливково-зеленое окрашивание.
Реакция с нингидрином.
0,02 г вещества растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 мин. Появляется вишневое окрашивание.
Задание III. Выполнить испытания на доброкачественность лекарственных препаратов природных и полусинтетических пенициллинов.
Ампициллина тригидрат
1. Ультрафиолетовый спектр 0,075% раствора вещества в воде в области от 210 до 360 нм имеет максимумы поглощения при длинах волн: 256±1 нм, 261±1 нм, 267±1 нм и должен быть идентичен спектру Государственного стандартного образца ампициллина тригидрата, снятому в тех же условиях.
2. Удельное вращение. От +260 до +305° в пересчете на сухое вещество (0,25% водный раствор).
3. рН. От 3,5 до 6,0 (0,25 % водный раствор, потенциометрически).
4. Светопоглощающне примеси.Около 0,141 г вещества (точная масса) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 322 им в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют воду. Оптическая плотность должна быть не более 0,2. Измерение оптической плотности проводят сразу после приготовления раствора.