Методические указания к практической работе. Продолжительность занятия: 3 академических часа (135 минут)
Продолжительность занятия: 3 академических часа (135 минут)
Место проведения занятия: учебная аудитория
Материально-техническое оснащение – таблицы, стенды, микроскопы, микропрепараты, вакцины
Хронометраж практического занятия:
1. Вводное слово преподавателя – 5 мин
2. Проверка исходного уровня знаний (тест-контроль) – 15 мин
3. Разбор теоретических вопросов по теме:«Treponema pallidum» - 40мин
a. Характеристика бледной спирохеты
b. Эпидемиология и патогенез сифилиса
c. Лабораторный диагноз первичного и вторичного сифилиса
d. Серологические методы диагностики сифилиса (микрореакция преципитации, ИФА, РНГА, РИФ, РИТ, РСК).
4. Разбор теоретических вопросов по теме «Leptospira» – 25 мин
a Классификация лептоспир
b Биологическая характеристика лептоспир
c 2. Эпидемиология лептоспирозов
d 3. Лабораторный диагноз лептоспирозов
5. Разбор теоретических вопросов по теме «Borrelia recurrentis» – 15мин
a Характеристика боррелий
b Лабораторный диагноз возвратных тифов
c Эпидемиология эпидемического возвратного тифа
d Эпидемиология эндемического возвратного тифа
e Методы лабораторной диагностики эпидемического возвратного тифа и эндемического возвратного тифа
6. Выполнение практической работы – 35 мин
Практическая работа
Treponema pallidum
1. Изучение бледной трепонемы в мазке из отделяемого твердого шанкра, окрашенного по Романовскому-Гимзе(зарисовать Treponema pallidum (Treponema лат. – сгибающая нить; pallidum- бледная)
В поле зрения видна бледно-розовая трепонема, так как она слабо воспринимает краситель, в то же время другие спирохеты имеют более темный цвет с фиолетовым или синим оттенком. Сифилитическая трепонема тоньше других спирохет, имеет 8–12 завитков, одинаковых по высоте и расстоянию между ними.
2. Знакомство со схемой лабораторного диагноза сифилиса по таблице(записать в тетрадь)
Бледная трепонема вызывает сифилис – первично хроническое инфекционное заболевание человека. Основным методом лабораторной диагностики является серологический, однако, при первичном сифилисе при наличии язвы и вторичном используют микроскопический метод диагностики. Классификация сифилиса:
1. Первичный – развивается спустя 10–90 сут (в среднем 21сут) после заражения.
2. Вторичный – развивается спустя 2–6 мес. После заражения или 2- 10 нед. после появления твердого шанкра.
3. Латентный (скрытый) – стадия болезни, при котором серологические реакции положительны, а какие-либо признаки поражения кожи, слизистых и внутренних органов отсутствуют:
- ранний латентный – менее 2 лет с начала заболевания;
- поздний латентный – более 2 лет с начала заболевания;
- неуточненный латентный.
4. Третичный – развивается через 3-7 лет после начала заболевания (от 2 до 60 лет), гуммы появляются через 15 лет.
5. Врожденный сифилис.
Микроскопический метод. Материалом для исследования при микроскопическом исследовании служат отделяемое твердого шанкра, мокнущих папул, эрозии шейки матки. Язву или другие проявления очищают ватой или марлей, смоченной физиологическим раствором хлорида натрия. Очищенную поверхность язвы осторожно раздражают, растирая края и дно прокаленным и остуженным металлическим шпателем или лопаточкой. Можно сжать края шанкра пальцами или пинцетом. Отделяемое появляется не сразу, каплю отделяемого набирают в пастеровскую пипетку и наносят на тонкое (не толще 1–2 мм) предметное стекло, хорошо очищенное и обезжиренное. Каплю сверху прикрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом в темном поле. Более полное представление дает исследование в фазово-контрастном микроскопе.
При исследовании тканевой жидкости шанкра или папул в темном поле видно большое количество мелких светящихся точек, находящихся в броуновском движении: эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки. Бледная трепонема в темном поле имеет вид нежной спирали, освещенной ровным светом, слабо блестит, тонкая. Движения ее плавные, изредка она сгибается под углом, особенно характерны для нее маятникообразные движения. Завитки равномерны по ширине, высота их несколько меньше по концам, верхушки закруглены.
Исследование в темном поле наиболее перспективно, но в некоторых случаях применяют исследование материала в окрашенных препаратах. Наилучшие результаты получают при окраске по Романовскому-Гимзе, вполне удовлетворительные результаты дает серебрение по Морозову.
Серологический метод. Серологический метод диагностики является ведущим, он наиболее доступен и его можно, использовать, начиная с 3–4-й недели во все периоды болезни, проводится согласно инструкции по постановке серологических реакций на сифилис, утвержденной в 2001 году. В зависимости от выявляемых антител серологические реакции подразделяются на группы:
А. Нетрепонемные реакции
1. Липидные (реагиновые) реакции:
а) микрореакция преципитации (МР) с липидными антигенами с плазмой крови и инактивированной сывороткой крови;
б) реакция Вассермана: качественная и количественная, термостатная и на холоде;
в) осадочные реакции (реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса-Витебского);
Б. Трепонемные реакции
1. Групповые трепонемные реакции:
а) РСК с протеиновым антигеном Рейтера;
б) РИФ;
в) реакция иммунного прилипания (РИП).
2. Видоспецифические протеиновые трепонемные реакции:
а) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ)
б) РИФ, ИФА
в) реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) бледных трепонем.
Для серологической диагностики всех форм сифилиса, контроля эффективности лечения применяют комплекс серологических реакций, включающий микрореакцию, РСК, реакцию Кана, РИТ и РИФ, ИФА, РНГА. Применение комплекса реакций необходимо потому, что чувствительность реакций при разных формах сифилиса неодинакова.
Микрореакция. Микрореакция преципитации (МР) основана на образовании преципитата при смешивании антител с кардиолипиновым антигеном в виде хлопьев белого цвета. В качестве антител используют плазму крови или сыворотку больного сифилисом. В качестве антигена используют кардиолипиновый антиген, который представляет собой раствор трех очищенных липидов: кардиолипина, лецитина и холестерина. Нельзя использовать кардиолипиновый антиген для РСК.
Для получения плазмы кровь берут из пальца так же, как для определения СОЭ. После отстаивания эритроцитов или центрифугирования плазму отсасывают и используют для постановки реакции только в день взятия крови. Если это требование выполнить нельзя, реакцию микропреципитации ставят с инактивированной сывороткой. Для получения сыворотки кровь берут из вены, после свертывания отсасывают сыворотку и инактивируют как для РСК. МР также ставится с плазмой, но только в день взятия крови из пальца.
Реакцию ставят на стекле или в лунках плестиглассовых пластин, добавляя к капле плазмы или сыворотке по каплям кардиолипиновый антиген. Стекло покачивают 4-5 минут, оценивают результат невооруженным глазом. Присутствие антител «реагинов» вызывает появление крупных хлопьев, которое оценивается как положительный результат по четырехбальной системе. При отсутствии антител наблюдают опалесценцию и оценивают реакцию как отрицательную. МР является отборочным тестом. Количественный вариант МР используется при обследовании больных сифилисом в процессе и после окончания лечения. Существует несколько вариантов микрореакции – VDRL (Veneral Disease Research Laboratory ), TRUST (Toluidine Red Unheated Serum Test), RST (Reagin Screen Test), RPR( Rapid Plasma Reagin).
МР обычно отрицательна в первые 7–10 дней после появления твердого шанкра.
Метод иммунофлюоресценции используют для выявления противотрепонемных антител. Существует несколько модификаций РИФ:
– РИФ-200 – с предварительным разведением исследуемой сыворотки 1:200 , что снижает количество ложноположительных реакций
– РИФ-ц – модификация для диагностики сифилитических поражений ЦНС с использованием цельной цереброспинальной жидкости
– РИФ-абс – реакция иммунофлюоресценции с абсорбцией, когда групповые антитела удаляют из исследуемой сыворотки с помощью абсорции разрушенными ультразвуком культуральными непатогенными трепонемами, что повышает специфичность
– IgM-РИФ- абс– основана на выявлении ранних противотрепонемных антител класса М
РПГА выявляет специфические трепонемные антитела. Применяется как подтверждающий тест на сифилис и для исключения ложноположительных результатов, полученных в МР.
ИФА является наиболее чувствительным и специфическим методом диагностики сифилиса. При её использовании выявляются специфические трепонемные антитела классов IgM и IgG. Метод ИФА применяют для диагностики сифилиса, дифференцирования ложноположительных результатов, полученных в РВ, контроля за эффективностью лечения. ИФА используют вместо РИТ и РИФ.
3. Оценить диагностическую значимость ИФА-диагностики сифилисапо таблице 24 (записать в тетрадь, оформить протокол)
Таблица 24
| Варианты | Антитела | Интерпретация результатов ИФА | ||
| суммарные | IgM | IgG | ||
| + | + | - | ? | |
| + | + | + | Манифестный сифилис (первичный серопозитивный, вторичный свежий, вторичный рецидивный | |
| + | - | + | ? |
4. Знакомство с препаратами для специфической диагностики, профилактики и лечения сифилиса (записать в тетрадь)
Антиген кардиолипиновый для реакции микропреципитации (Антиген кардиолипиновый для РМП). Диагностический препарат для использования in vitro. Применяется для диагностики сифилиса для исследования активной плазмы или инактивированной сыворотки в реакции микропреципитации. Способен выявлять антитела к возбудителю сифилиса. Прозрачный бесцветный раствор со специфическим запахом спирта. Представляет собой раствор трех высокоочищенных липидов: кардиолипина, лецитина, холестерина в абсолютном этиловом спирте. 1 мл препарата содержит: кардиолипин-стандарт – 0.3 мг, лецитин-стандарт – 2.7 мг, холестерин – 9 мг, этанол безводный. Раствор холин-хлорида: холин-хлорид – 700 мг, натрия хлорид, вода очищенная. Раствор-комплект: по 2 мл антигена кардиолипинового в ампуле, по 5 ампул; по 5 мл холин-хлорида во флаконе, по одному флакону; по 2 комплекта в пачке. Хранить в сухом, защищенном от света месте, при температуре 15 ± 5 °С.
Транспортировка осуществляется всеми видами крытого транспорта в условиях, исключающих возможность замораживания. Допускается транспортировка при температуре до + 37 °С не более 72 часов. Допускается выпадение крислаллов холестерина на холоде, которые легко растворяются при температуре (37 ± 1) °С.
Leptospira
Лептоспиры в темном поле
В поле зрения на темном фоне лептоспиры имеют вид блестящих нитей длиной 6-10 мкм, совершающих быстрые поступательные и вращательные движения. Оба конца лептоспир изогнуты в виде крючков, поэтому возбудитель имеет S, C форму, на конце крючков видны пуговчатые утолщения.
2. Знакомство со схемой лабораторного диагноза лептоспирозов по таблице(зарисовать)
В составе рода Leptospira выделяют 2 вида:
а) патогенные лептоспиры объединены в один вид Leptospira interrogans, которые, исходя из различий в антигенах, разделены на 200 сероваров. Среди них патогенны для человека: L.icterrohaemo-rrhagiae, L.canicola, L.grippotyphosa, L.pomona, L.haebdomadis и др. Основной фактор патогенности лептоспир – эндотоксин, вызывающий общую интоксикацию и кровоизлияния за счет повышения проницаемости сосудов.
б) сапрофитные лептоспиры – Leptospira biflexa – свободноживущие (морская вода, влажные почвы, заливные луга и др.).
Лептоспиры вызывают острые лихорадочные заболевания, которые в зависимости от возбудителя, тяжести течения и выраженности отдельных симптомов делят на 3 главные формы:
- иктерогеморрагический лептоспироз, который вызывает L.icterrohaemorrhagiae, он протекает с выраженной желтухой;
- лептоспироз каниколя, возбудитель которого L.canicola, он характеризуется кровоизлияниями;
- доброкачественные безжелтушные лептоспирозы,объединенные под общим названием «водная лихорадка», возбудителями которой являются десятки сероваров лептоспир, в том числе L.pomona, L. grippotyphosa и др.
Для микробиологической диагностики лептоспирозов используют методы:
- бактериоскопический
- бактериологический
- серологический
- биологический
Бактериоскопический метод. Бактериоскопический метод основан на обнаружении лептоспир в исследуемом материале. Его применяют в период повышения температуры с 1 по 5–7 день болезни. В качестве исследуемого материала используют кровь, спинномозговую жидкость. Кровь забирают асептично в объеме 5 мл и смешивают с цитратом натрия, отстаивают 1 час. На исследование берут верхний слой жидкости.
Спинномозговую жидкость берут специальной иглой в стерильную пробирку.
С 10–16 дня болезни на микроскопическое исследование берут мочу стерильным катетером в стерильную посуду.
Для приготовления мазка из отстоявшейся крови берут верхний слой жидкости, мочу и ликвор предварительно центрифугируют, мазок готовят из осадка. Лептоспиры с трудом воспринимают окраску, поэтому микроскопируют нативный материал с живыми возбудителями в темном поле, из каждой пробы материала готовят не менее 10–15 препаратов. Микроскопический метод имеет ориентировочное значение и требует подтверждения другими методами диагностики.
Бактериологический метод. Бактериологический метод основан на выделении чистой культуры лептоспир из исследуемого материала, который засевают на среду Уленгута (водно-сывороточная среда) или специальную среду для лептоспир у постели больного. Посевы помещают в термостат при 28 °С, через каждые 5–6 дней контролируют рост, наблюдают в течение 3 месяцев.
Размножение лептоспир происходит медленно, плотность концентрации их в растворе невысокая, поэтому среда в пробирках остается прозрачной в течение всего времени наблюдения. Контроль роста производят при помощи микроскопии раздавленной капли в темном поле.
При обнаружении лептоспир проводят их идентификацию в реакции агглютинации с типовыми лептоспирозными сыворотками.
Серологический метод. Серологический метод основан на выявлении антител в сыворотке больных, которые обнаруживаются с 6–8 дня болезни. Для обнаружения антител используют реакцию агглютинации-лизиса. Для постановки реакции исследуемую сыворотку прогревают, готовят 5–6 двукратных разведений от 1:50 до 1:800–1:1600, которые разливают в несколько рядов панели или пробирок, к каждому разведению добавляют в качестве антигена живые типовые культуры лептоспир. После перемешивания оставляют в термостате на 1 час, результат учитывают в темном поле.
При учете реакции отмечают феномен лизиса и агглютинации. Реакция агглютинации лептоспир, не сопровождающаяся лизисом, не может считаться специфичной. Диагностическим титром считают 1:100, максимальный титр наблюдают на 14–17-й день. Антитела сохраняются в крови длительное время, поэтому серологическое исследование рекомендуется проводить в динамике. Нарастание титра антител при повторном исследовании, безусловно, свидетельствует о заболевании.
Для постановки серологического диагноза можно использовать РСК. Комплементсвязывающие антитела появляются в крови больных с 5–6 дня болезни и сохраняются 8–10 месяцев после выздоровления. В качестве антигена используется поливалентный антиген, приготовленный из 20 сероваров, высушенных лептоспир, наиболее часто встречающихся. Методика выполнения реакции не отличается от общепринятой. Положительной считается реакция в разведении 1:10 при интенсивности 4 и 3 плюса.
Биологический метод. Биологический метод основан на выделении лептоспир путем заражения животных. Для этого используют кроликов-сосунков 7–8-дневного возраста, которых заражают внутрибрюшинно или подкожно. ПЕРСОНАЛ ДОЛЖЕН РАБОТАТЬ В РЕЗИНОВЫХ ПЕРЧАТКАХ. За животными наблюдают 15 дней, делая высевы из крови. Если в материале были лептоспиры, то через 3–5 суток животные заболевают и погибают, тогда делают посевы из органов. Если нет кроликов, то используют молодых морских свинок, белых мышей. Целесообразно для заражения животных пользоваться разным материалом в зависимости от периода болезни: до 5-6 дня болезни вводят животным кровь, с 8 дня – спинномозговую жидкость, с 13 дня – утреннюю порцию мочи.
3. Оценить диагностическую значимость серологического метода в диагностике лептоспироза по таблице 25(сделать заключение, оформить протокол)
Таблица 25
| Сроки взятия сыворотки крови, дни | Разведение сыворотки, титр | Контроль | |||
| 1:400 | 1:800 | 1:1600 | 1:3200 | ||
| 8-й день заболевания | - | - | - | - | - |
| 15-й день заболевания | + | + | + | - | - |
Вывод:
4. Знакомство с препаратами для специфической диагностики, профилактики и лечения лептоспироза(записать в тетрадь)
Лептоспирозная вакцина.Лептоспирозная вакцина представляет собой взвесь убитых нагреванием лептоспир. Используется для создания иммунитета против наиболее распространенных видов лептоспир. Для приготовления вакцины культуру каждого вида лептоспир выращивают в жидкой питательной среде до определенной концентрации, затем убивают нагреванием при 56 °С, смешивают с убитыми культурами других видов и консервируют 0,3% р-ром фенола. Вакцину применяют для создания активного иммунитета у людей, подвергающихся опасности заражения. Против лептоспироза вакцинируют людей в очагах инфекции, подвергающихся опасности заражения от животных: ветеринаров, зоотехников, свинарок, телятниц, пастухов, птичниц, рабочих собачьих питомников и звероводческих ферм, работников мясокомбинатов, лиц, занятых уборкой сена на заливных лугах, отловом рыбы в пресных водоемах, охотников.
Вакцину вводят подкожно со строгим соблюдением правил асептики в виде двух инъекций с интервалом в семь дней. Детей в возрасте от 7 до 16 лет вакцинируют только по эпидемическим показаниям, особое внимание уделяют тому контингенту детей, которые проживают в сельской местности, на территории которой расположены водоемы, загрязняемые животными (водопои, стоки ферм). На введение вакцины вырабатывается активный поствакцинальный иммунитет, относительно кратковременный, поэтому по показаниям через год проводят ревакцинацию путем однократного введения вакцины. Ревакцинация при лептоспирозе является не лучшим способом профилактики. Основные усилия должны быть направлены на ликвидацию источников инфекции, главным образом, среди сельскохозяйственных животных. Эти мероприятия должны разрабатываться и осуществляться совместно медицинской и ветеринарной службой.
Гамма-глобулин противолептоспирозный. Противолептоспирозный гамма-глобулин представляет собой поливалентный препарат, содержащий иммунологически наиболее активную фракцию сыворотки, получаемую из крови гипериммунизированных волов путем осаждения и последующего растворения гамма-глобулиновой фракции белков спиртовым методом при низкой температуре. Содержание антител в 2–3 раза превышает таковое в исходной иммунной сыворотке. Активность препарата оценивают в реакции агглютинации, титр должен быть не менее 1:8000 в отношении всех лептоспир, из которых приготовлена вакцина. Препарат предназначен для лечения лептоспироза, при ее введении формируется пассивный иммунитет. Предварительно необходимо определить индивидуальную чувствительность больного к воловьему белку. Раннее применение гамма-глобулина приводит к ослаблению явлений интоксикации, снижению температуры, исчезновению менингеальных симптомов.
Borrelia
1. Изучение Borrelia в мазке из крови, окрашенном по Романовскому-Гимзе (зарисовать)
В поле зрения среди лейкоцитов и эритроцитов видны тонкие извитые спирохеты, имеющие от 4 до 12 неравномерных завитков, длина которых превышает диаметр эритроцитов в 3–6 раз. Боррелии окрашены в фиолетовый цвет, эритроциты – в розовый, ядра лейкоцитов – в фиолетовый.
2. Знакомство с лабораторной диагностикой эпидемического возвратного тифа(составить схему, записать в тетрадь)
Лабораторная диагностика эпидемического возвратного тифа предусматривает выявление боррелий и дифференциацию их от возбудителей эндемического возвратного тифа. Основным методом лабораторной диагностики является бактериоскопический. Материалом для исследования служит кровь, которую берут во время нарастания температуры или на высоте ее. Из крови готовят мазки или толстую каплю.
а) толстая капля. Асептично прокалывают подушечку пальца скарификатором. Предметным стеклом касаются капли крови и, не отнимая стекла от капли, круговыми движениями доводят диаметр капли до 1–1,5 см.
б) приготовление мазка: предметным стеклом касаются выступившей капли крови, ребром другого шлифованного стекла размазывают каплю по стеклу.
Толстую каплю красят по Романовскому-Гимзе. Мазок красят или по Романовскому-Гимзе, или разведенным водой фуксином (1:2). Невысохшие нативные мазки можно изучать в темном поле.
Отсутствие боррелий в мазке не позволяет при характерной клинической картине снять диагноз, требуются повторные исследования.
Серологический метод диагностики основан на обнаружении антител в реакции иммобилизации боррелий, агглютинации-лизиса, нагрузки боррелий тромбоцитами.
Для постановки реакций нагрузки боррелий тромбоцитами сыворотку крови больного смешивают с плазмой крови морской свинки, к смеси добавляют каплю крови больного, содержащую возбудителя. Смесь помещают в термостат на 15 минут, после чего берут каплю смеси со дна пробирки, наносят на предметное стекло и исследуют в “темном поле”. Антитела, содержащиеся в сыворотке, адсорбируют на поверхности боррелий тромбоциты и препятствуют их движению.
Для дифференциации боррелий возвратного тифа от возбудителей эндемического возвратного тифа кровью больного заражают морских свинок подкожно или на слизистую глаза. К возбудителю эпидемического возвратного тифа морские свинки нечувствительны и останутся живыми.
3. Знакомство с препаратами для специфической диагностики, профилактики и лечения боррелиоза(записать в тетрадь)
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Ig A, M, G, E, D – иммуноглобулины А, М, G,E, D
СВА – чистая линия мышей
АС-анатоксин – адсорбированный столбнячный анатоксин
АДС-анатоксин – адсорбированный дифтерийно-столбнячный
анатоксин
АДС-М – адсорбированный дифтерийный и столбнячный
анатоксин с уменьшенным содержанием антигенов
АКДС-вакцина – адсорбированная коклюшно-дифтерийно-
столбнячная вакцина
ВР-индикатор – индикатор бром-тимоловый синий
ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота
ЖСА – желточно-солевой агар
ИФА – иммуноферментный анализ
КПЛ – клещевая пятнистая лихорадка
КУА – казеиново-угольный агар
ЛПС – липополисахариды
МБС – микроскоп бинокулярный стереоскопический
МПА – мясо-пептонный агар
ОКБ – общие колиформные бактерии
ПДРФ ДНК ПЦР – анализ полиморфизма длин рестрикционных
фрагментов амплифицированной в полимеразной цепной
реакции ДНК
ПЦР – полимеразно-цепная реакция
РИА – радиоиммунный анализ
РИФ – реакция иммунофлуоресценции
РНГА – реакция непрямой гемагглютинации
РНИФ – реакция непрямой иммунофлуоресценции
РПГА – реакция пассивной гемагглютинации
РСК – реакция связывания комплемента
СДК – контрольная противодифтерийная сыворотка
СМЖ – спинно-мозговая жидкость
ССК – контрольная противостолбнячная сыворотка
СТ – сыпной тиф
TABTе-вакцина – химическая сорбированная тифозно-
паратифозно-столбнячная вакцина
ЭДТА – этилендиаминтетрауксусная кислота
ЭИКП (EIEC) – энтероинвазивная кишечная палочка
ЭПКП (EРEC) – энтеропатогенная кишечная палочка
ЭТКП (EТEC) – энтеротоксигенные кишечные палочки
Приложение
УИРС – «Носительство патогенных стафилококков на слизистой носа студентов, обучающихся на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии»
Цель занятия.Рассмотреть значение носительства стафилококков в эпидемиологии стафилококковых инфекций, разобрать основные этапы бактериологического диагноза носительства стафилококков. Провести цитоскопическое исследование на стафилококковое бактерионосительство
Контрольные вопросы:
1. Категории носительства стафилококков
2. Роль носительства в распространении стафилококковых инфекций
3. Этапы лабораторного исследования на носительство патогенных стафилококков
Носительство возбудителей заболеваний – одна из форм инфекции, когда патогенный микроб обитает в организме хозяина, не вызывая патологических изменений в структуре и функциях организма, выделяется в окружающую среду, может заразить другой организм и явиться причиной новых случаев заболевания. Несмотря на повсеместное распространение стафилококков, исследователей интересует, прежде всего, обнаружение патогенных стафилококков, так как только такой подход к этой проблеме позволит правильно оценить эпидемиологическую ситуацию. Основными источниками стафилококковой инфекции являются здоровые люди, а также больные с гнойно-воспалительными процессами. Основным биотопом (местом обитания) патогенных стафилококков считают слизистую оболочку передних отделов носовой полости. Полагают, что слизистая зева, кожа, кишечник обсеменяются вторично.
Люди могут содержать более или менее значительные количества патогенных стафилококков в носу, а также быть свободными от них. По этому признаку Г. Н. Чистович (1969) предложил разделить носителей по категориям, оценивая их по массивности обсеменения и эпидемиологической значимости.
1. Постоянные носители “резидентного” типа. Носители, у которых слизистая оболочка носа является местом обитания и размножения одного и того же штамма стафилококков. Массивное (высокое) обсеменение слизистой, выделенные культуры обладают не только патогенными свойствами, но и множественной антибиотикорезистентностью. Эпидемиологическая значимость очень высокая. С учетом опасности выделенных штаммов таких носителей называют “злостными”.
2. Постоянные носители “транзиторного” типа. Это носители, от которых постоянно выделяют патогенные стафилококки, но количество их может меняться. Эпидемиологическая опасность ограниченная. Вероятно, на слизистой носа этих людей стафилококки находят условия только для временного пребывания.
3. Временные носители. Это носители, у которых патогенные стафилококки обнаруживаются непостоянно, количество их бывает различным. Эпидемиологическая опасность таких носителей ничтожна.
4. Люди, постоянно свободные от носительства. Это те, у которых патогенные стафилококки не обнаруживаются.
Особую эпидемиологическую опасность представляют “злостные” носители, находящиеся в лечебных учреждениях, особенно в родовспомогательных и хирургических отделениях. Этими “злостными” носителями могут быть не только больные с гнойно-воспалительными процессами, но и медицинский персонал. Пути передачи могут быть самыми разнообразными, больные же, находящиеся в стационаре, чрезвычайно восприимчивы, так как иммунный ответ у них ослаблен предшествующим заболеванием, активной антибиотикотерапией, использованием гормональных препаратов. Циркулирующие штаммы через организм восприимчивых людей обладают повышенной вирулентностью. Эти штаммы называют “эпидемическими”. Они обусловливают развитие внутрибольничных или «госпитальных» инфекций.